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技術文章

細胞無血清培養基被廣泛應用與哪些地方？如何使用？

更新時間：2022-01-12

　　細胞無血清培養基被廣泛的應用于培養哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清培養基含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細胞培養中發揮各種不同的功能，如提供細胞貼壁所需的基質，抗生物反應器剪切力，作為脂質和其他生長分化因子的載體等。

　　無血清培養基應用的優點：

　　（1）成分的限定性；

　　（2）產品質量一致性；

　　（3）簡化生產過程；

　　（4）易于控制培養環境；

　　（5）細胞類型的優化配方。

　　無血清培養基應用

　　1、DC細胞、CIK細胞和NK細胞的長期增殖培養

　　2、PBL細胞和TIL細胞的長期增殖培養

　　3、單核細胞和巨噬細胞的長期增殖培養

　　4、T淋巴細胞的長期增殖培養

　　細胞無血清培養基使用方法

　　1、采集與分離外周血采集外周血，Ficoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。

　　2、單個核細胞的接種與誘導活化

　　1)0d時，繃胞計數。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

　　2)1d時(24小時)，添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經接種細胞的培養液中。將YC005添加至未經使用的培養基中，待用。

　　3、細胞的連續培養與擴增

　　1)3d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1：2左右（原有培養液體積：新加培養液體積）

　　2)5d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1：3左右。

　　3)7d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(06-08）x106cell/mL。補液比例大致在1：2左右。

　　4)9d時，將剩余培養液全部加入。

　　4、收獲細胞

　　培養周期結束后，依據細胞量收獲細胞。

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